CFU protocolli

unità di formazione di colonie o CFU, è una misura del numero di microrganismi. A differenza di altri metodi, come microscopica diretta in cui sono considerati i microrganismi vivi e morti, i protocolli CFU permette ai biologi di contare le cellule vitali solo. unità di misura standard sono unità formanti colonia per millilitro per liquidi e unità formanti colonia per grammo di solidi. protocolli CFU sono ampiamente utilizzati nella ricerca biotecnologica.

CFU-MK Assay per acuta trombocitopenia protocollo

Megakariocyte o MK, è un tipo di cellule del midollo osseo che produce piastrine. Questo protocollo è utilizzato in studi circa la trombocitopenia, una condizione relativa a numeri bassi di piastrine. Prima del conteggio, i tecnici hanno preparato il test CFU- MK a cellule di cordone umano sangue, modificata medio Dulbecco di Iscove, soluzione collagene bovino, mezzo privo di siero con proteine ​​chiamate citochine, anticorpi anti-TNP, anti-glicoproteina IIb / IIIa e anti-- IgG di topo, Evans colorante di contrasto blu, Tris / tampone NaCl e albumina di siero bovino.

Protocollo Colony Assay Mix

I tecnici preparano questo test con il plasma umano, la sostanza chimica 2-mercaptoetanolo, supporti leucociti condizionata, l'ormone eritropoietina e modificato medie Dulbecco di Iscove, secondo Jeffrey W. Pollard in "protocolli di base coltura cellulare." Questa soluzione viene poi miscelato con i campioni di cellule da analizzare. viene aggiunto metilcellulosa, ed i campioni vengono incubati in atmosfera umidificata con 5 per cento di anidride carbonica per 14 giorni.

La migrazione di CFU in cellule CD34

CD34, o gruppo di molecole di differenziazione, sono presenti su alcune cellule immunodefense umani, in qualità di fattore di aderenza controllato delle membrane cellulari. Le cellule contenenti tali proteine ​​possono avere la capacità di migrare da un tessuto all'altro. Nel corso di questo protocollo, i tecnici lavare i campioni di CD34 migrati cellule per rimuovere cytokynes proteine. I campioni vengono centrifugati e risospesi in un mezzo contenente crescere fattori. Le colonie sono contate due settimane più tardi.